ICS 65.020 B 04 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3493—2019 农业生物质原料 粗蛋白测定 Agricultural biomass raw materials-Determination of crude protein 行业标准信息服务平台 2019-11-01实施 2019-08-01发布 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3493—2019 品标准 前 公共服务 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草 本标准由农业农村部科技教育司提出并归口 本标准起草单位：中国农业大学。 本标准主要起草人：韩鲁佳、肖卫华、刘贤、杨增玲、黄光群、陈雪礼。 务平台 NY/T 3493—2019 农业生物质原料粗蛋白测定 1范围 本标准规定了农业生物质原料中粗蛋白质含量的凯氏定氮方法。 本标准适用于农业生物质原料（农作物秸秆和畜禽粪便）粗蛋白的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 NY/T3492农业生物质原料样品制备 3试剂和材料 除非另有说明，在分析中应使用分析纯试剂，水为GB/T6682规定的三级水。 3.1试剂 3.1.1硫酸铜(CuSO·5H,O)。 3. 1.2石 硫酸钾（KzSO)。 3.1.3 硫酸（H,SO）。 3. 1. 4 硼酸（HBO3）。 3.1.5 甲基红指示剂(CisHisN.O2）。 3. 1. 6 溴甲酚绿指示剂(C2iHiBr,OsS)。 3. 1.7 亚甲基蓝指示剂（C1H18CN3S·3HzO)。 3.1.8 氢氧化钠(NaOH)。 3.1.99 95%乙醇(CHsOH) 3.2试剂配制 3.2.2硼酸溶液（10g/L）：称取100g硼酸，加水溶解后并稀释至10L。 3.2.3全 氢氧化钠溶液（400g/L）：称取40g氢氧化钠加水溶解后放冷，并稀释至100mL。 3.2.4 盐酸标准滴定溶液[c(HCI)0.100 mol/L。 3.2.5 甲基红乙醇溶液（1g/L）：称取100mg甲基红，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100mL。 3.2.6 溴甲酚绿乙醇溶液（1g/L）：称取100mg亚甲基蓝，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100mL。 3.2.7 硼酸吸收液：在10L硼酸溶液中加人100mL溴甲酚绿乙醇溶液和70mL甲基红乙醇溶液。 4仪器和设备 4.12 分析天平：感量1.0mg。 4.2消化炉：带冷凝回流罩。 4.3凯氏消化管：250mL。 4.4凯氏定氮仪。 5分析步骤 5.1试样制备 1 NY/T 3493—2019 按照NY/T3492的规定执行。 5.2消化 称取约1.000g试样，精确至1.0mg，移人凯氏消化管内，注意不要将样品沾在消化管内壁上。加人 7.80g混合催化剂及12mL~15mL硫酸，轻轻摇动消化管，以确保试样完全浸润。将消化管放在预热 至200℃的消化炉上，加盖冷凝回流罩。消化炉升温至420℃消解1h～2h，得到澄清透明的消解液，待管 内液体冷却后取出消化管。整个消化过程须在通风橱中进行。 5.3蒸馏和滴定 消化管中加人60mL～80mL水，将蒸馏装置的冷凝管末端浸入装有30mL硼酸吸收液的接收瓶 内，然后向凯氏消化管中加人60mL氢氧化钠溶液开始蒸馏。在接收瓶内利用标定好的盐酸标准滴定 溶液进行滴定，溶液由粉红色变成蓝灰色为终点，记录消耗盐酸的体积 5.4氮回收率的检验 在测定试样前，先进行 0.67g蔗糖代替试样，按 3步媒进行城 铵氮回收率 5.2 ≥99° ，否则应检查消化、蒸馏 TAND NG 和滴定各步骤是否正确 6结果计算 6.1总氮含量 量 人质量百分数表票按式（ 试样中的总氮含 RAL 式中： N 中的总舞 试样 含量，单位为质量百分数（%） Vs 试样 VB 液滴定消耗盐酸标准滴定溶液的体积单位为毫升（mL 未准滴定 c 试存 质量 m 6.2蛋白含量的计 d 试样中的粗蛋白 表示 P (2) X 试样中的总 氮合量， 蛋白换算系数， ，衣作物秸科的蛋自换算系数参考值为5.0，畜类 肉牛、奶牛、生猪）粪便蛋 白换算系数了 禽类蛋鸡鸡使的蛋白换算系数参考值为4.0。 参考值为4. 测定结果用平行测定的算术平均值表示，结果保留2位有效数字 7精密度 在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10% 2