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SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1980—2007 进出口动物源性食品中 孕激素类药物残留量的检测方法 高效液相色谱-质谱/质谱法 Determination of progestogens residues in food of animal origin for import and export-HPLC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2007-08-06发布 2008-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1980—2007 前 言 本标准的附录A和附录B均为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国山东出人境检验检疫局、中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、中华人 民共和国上海出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院负责起草。 本标准主要起草人:林黎明、张鸿伟、岳振峰、朱坚、彭涛、蔡发、杜恒清、陈永平。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 SN/T 1980—2007 进出口动物源性食品中 孕激素类药物残留量的检测方法 高效液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了动物源性食品中17α-羟孕酮、烯丙孕素、炔诺孕酮、炔诺酮、美仑孕酮、甲地孕酮、孕 酮、甲羟孕酮、氯地孕酮等九种孕激素类药物残留量的制样、液相色谱-质谱/质谱测定和确证方法。 本标准适用于内脏、肌肉、水产品、蜂蜜及牛奶等动物源性食品中17α-羟孕酮、烯丙孕素、炔诺孕 酮、炔诺酮、美仑孕酮、甲地孕酮、孕酮、甲羟孕酮、氯地孕酮等九种孕激素类药物残留量的测定。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 GB/T6682—1992分析实验室用水规格和试验方法 3样品制备与保存 3.1制样要求 制样操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化 3.2动物肌肉、内脏和水产品 从所取全部样品中取出有代表性样品可食部分约500g,用组织捣碎机充分捣碎均匀,装入洁净容 器中,密封,并标明标记,于一18℃以下冷冻存放。 3.3牛奶、蜂蜜样品 从所取全部样品中取出有代表性样品500g,充分混匀,均分成两份,分别装入洁净容器中,密封,并 标明标记,于一18℃以下冷冻存放。 4方法提要 试样中加入适量乙酸铵缓冲液经酶解后,用乙晴提取样品中九种孕激素类残留,正已烷-二氯甲烷 5试剂和材料 5.1乙睛,色谱级。 5.2正已烷,色谱级。 5.3二氯甲烷,色谱级。 5.4甲醇,色谱级。 5.5冰乙酸,色谱级。 5.6正丙醇,色谱级。 5.7乙酸铵。 SN/T 1980—2007 5.8β葡糖苷硫酸酯酶。 5.9乙酸铵缓冲溶液:溶解11.6g乙酸铵(5.7)于980mL水中,用冰乙酸调节溶液pH值到5.2,最后 用水稀释至 1 L。 5.10正已烷-二氯甲烷溶液:取正已烷(5.2)80mL,二氯甲烷(5.3)20mL,混合后振摇混匀。 5.11ClsSPE柱:500mg,3mL,或相当者,使用前依次用5mL甲醇,5mL水活化。 酸甲羟孕酮、氯地孕酮、17α-羟孕酮-D8、孕酮-D9标准品:纯度≥95%。 5.13标准溶液: 5.13.1标准储备溶液:分别准确称取适量九种孕激素相应化合物标准品(5.12),用乙睛溶解定容至 100mL,得质量浓度分别为1000μg/mL的标准储备溶液。此储备液可在一20℃以下避光存放6个月。 5.13.2混合标准中间液:准确吸取各种孕激素类标准储备液(5.13.1)适量,用乙睛准确稀释到各种孕 激素类药物的浓度为100μg/L,此中间液可在一20℃以下避光存放3个月。 5.13.3氛代内标储备溶液:分别准确称取适量17α-羟孕酮-D:、孕酮-Dg标准品(5.12),分别用乙睛准 确溶解并稀释至溶液浓度为1000μg/mL。此储备液可在一20℃以下避光存放6个月。临用前根据需 要用乙睛稀释至适当浓度,作为混合标准内标工作液,一20℃冰箱保存。 5.13.4混合代内标中间液:准确吸取各种孕激素代内标储备液(5.13.3)适量于棕色容量瓶中,用 5.13.5混合标准工作液:混合标准工作液根据需要使用前用空白样品基质溶液配制。 6仪器和设备 6.1高效液相色谱串联四级杆质谱仪或相当者:配有电喷雾离子源。 6.2分析天平:感量0.1mg,0.01g。 6.3旋转蒸发器。 6.4固相萃取装置。 6. 5 旋涡混合器。 6.6高速冷冻离心机,10000r/min。 6.7# 移液枪,10μL~100μL,100μL~1000μL。 6.8 pH计。 6.10组织捣碎机。 6.11均质器。 6.12超声波仪。 6.13吹氮浓缩仪。 6.14恒温水浴。 6.15振荡器。 7测定步骤 7.1样品提取 内标中间液,加人5mL乙酸铵缓冲液(5.9),在均质器中均质30s,加入60uLβ葡糖苷硫酸酯酶 (5.8),混勾30s,于40℃恒温水浴中振摇过夜,然后放冷至室温,加入乙20mL,于涡旋混合器上混 2
SN-T 1980-2007 进出口动物源性食品中孕激素类药物残留量检测方法 高效液相色谱-质谱-质谱法
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